Víreas deilgneach mona Kit PCR Fíor-ama

1. SamplaBailiúchán:Ba chóir eiseamal a bhailiú i feadáin steiriúla i gcomhréir

le sonraíochtaí teicniúla caighdeánacha.

2. Ullmhúchán Imoibrí (Limistéar Ullmhúcháin Imoibrí)

Tóg amach comhpháirteanna an trealaimh, cothromaigh iad ag teocht an tseomra le húsáid fuireachais.

3. Próiseáil Eiseamail (Limistéar Próiseála Eiseamail)

3.1 Eastóscadh aigéid núicléasaigh

Moltar samplaí leachtacha 200μL a ghlacadh, Rialú Dearfach agus Rialú Diúltach d'eastóscadh aigéad núicléach, de réir na gceanglas agus na nósanna imeachta comhfhreagracha a bhaineann le feisteáin eastóscadh DNA víreasach.

3.2 Tuaslagadh púdar lyophilized agus cur leis an teimpléad

Ullmhaigh premix Víreas Mónkeypox Lyophilized de réir líon na samplaí.Tá feadán PCR amháin ag teastáil ó shampla amháin ina bhfuil púdar premix Lyophilized.Ba cheart rialú diúltach & rialú dearfach a láimhseáil mar dhá shampla.

(1) Cuir Réiteach Tuaslagtha 15μL isteach i ngach feadán PCR ina bhfuil premix Lyophilized, ansin cuir 5μL samplaí asbhainte / Rialú Diúltach / Rialú Dearfach isteach i ngach feadán PCR faoi seach.

(2) Clúdaigh feadáin PCR go docht, flick feadáin PCR de láimh go dtí go bhfuil an púdar lyophilized tuaslagtha agus a chumasc go hiomlán, bailigh an leacht go bun feadáin PCR trí lártheifneoiriú meandarach íseal-luas.

(3) Má úsáidtear ionstraim PCR coiteann Fíor-ama le haghaidh braite, ansin aistrigh feadáin PCR go díreach chuig an limistéar aimpliúcháin;má úsáidtear BTK-8 le haghaidh braite, is gá na hoibríochtaí seo a leanas a dhéanamh: leacht 10 μL a aistriú ó fheadán PCR go dtí an tobair sliseanna imoibrithe BTK-8.Freagraíonn feadán PCR amháin le tobar amháin ar an sliseanna.Le linn oibriú píobaireachta, cinntigh go bhfuil an pípéad 90 céim ingearach.Ba chóir leideanna an phípéad bacainn aerasóil a chur i lár an tobair le fórsa measartha agus stop a chur leis an bpípéad a bhrú nuair a shroicheann sé an chéad ghiar (chun boilgeoga a sheachaint).Tar éis na toibreacha a líonadh, tóg amach membrane sliseanna imoibriúcháin chun gach tobar a chlúdach agus aistrítear an sliseanna ansin chuig an limistéar braite aimpliúcháin.

4. Aimpliú PCR (Limistéar Braite)

4.1 Cuir na feadáin PCR/sliseanna imoibrithe san umar imoibrithe agus socraigh ainmneacha gach imoibrithe go maith san ord comhfhreagrach.

4.2 Socruithe an fhluaraiseachta braite: (1) Víreas deilgneach mona (FAM);(2) Rialú Inmheánach (CY5).

4.3 Rith an prótacal rothaíochta seo a leanas

Prótacal ABI7500, Bith-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

 Prótacal BTK-8:

5. Anailís ar thorthaí (féach Lámhleabhar Úsáideora na nIonstraimí le do thoil)

Tar éis an imoibrithe, déanfar na torthaí a shábháil go huathoibríoch.Cliceáil “Analyze” chun anailís a dhéanamh, agus léirmhíneoidh an uirlis luachanna Ct gach sampla sa cholún toraidh go huathoibríoch.Cloífidh na torthaí rialaithe diúltacha agus dearfacha leis an méid seo a leanas "6. Rialú Cáilíochta".

6. Rialú Cáilíochta

6.1 Rialú Diúltach: Gan Ct nó Ct> 40 i gcainéal FAM, Ct≤40 i gcainéal CY5 le cuar aimplithe gnáth.

6.2 Rialú Dearfach: Ct≤35 i gcainéal FAM le cuar aimplithe gnáth, Ct≤40 i cainéal CY5 le cuar aimplithe gnáth.

6.3 Tá an toradh bailí má chomhlíontar na critéir thuas go léir.Seachas sin, tá an toradh neamhbhailí.

Léiriú Torthaí

Is féidir na torthaí seo a leanas:

NÓTA: Má tharlaíonn toradh neamhbhailí, is gá an sampla a bhailiú agus a thástáil arís.